技術文章
Technical articles3T3swissSwiss小鼠胚胎成纖維細胞A549人肺癌細胞（能產生Keratin）CHOdhfr二氫葉酸缺陷型中國倉鼠卵巢細胞CHO-K1中國倉鼠卵巢細胞Cyc-tAg小鼠T淋巴細胞瘤（SV40T抗原轉染）DU145人前列腺癌細胞FDC-P1小鼠正常骨髓細胞GH3大鼠垂體瘤細胞GT1.1人垂體瘤細胞（分泌促生長激素分泌激素）HEK-293人胚腎細胞Hela人宮頸癌細胞MC3T3-E1小鼠胚胎成骨細胞MCF7人乳腺癌細胞MDA-MB-231人乳腺癌細胞MDA-MB-435s...
一、導論質粒提取的原理:轉自復旦大學一位老師的帖子，后面是方法介紹堿裂解法從大腸桿菌制備質粒，是從事分子生物學研究的實驗室每天都要用的常規技術。可是我收研究生十幾年了，幾乎毫無例外的是我那些給人感覺什么都知道的學生卻對堿法質粒抽提的原理知之甚少。追其原因，我想大概是因為《分子克隆》里面只講實驗操作步驟，而沒有對原理進行詳細的論述。這是導致我的學生誤入歧途的主要原因。后來我發現其實是整個中國的相關領域的研究生水平都差不多，甚至有很多“老師”也是這個狀態。這就不得不讓人感到悲哀了...
FluorescentDye（熒光染料）Excitation（激發波長，nm）Emission（發射波長，nm）Cy2489506GFP（RedShifted）488507YO-PRO-1491509YOYO-1491509Calcein494517FITC494518FluorX494519Alexa488490520Rhodamine110496520ABI,5-FAM494522OregonGreen?500503522OregonGreen?488496524Rlbo...
（一）原理DEAE-SephadexA-50（二乙基氨基乙基-葡聚糖A-50）為弱堿性陰離子交換劑。用NaOH將CL-型轉變為OH-型后，可吸附酸性蛋白。血清中的γ球蛋白屬于中性蛋白（等電點為PH6.85～7.5），其余均屬酸性蛋白。在PH7.2～7.4的環境中，酸性蛋白均被DEAE-SephadexA-50吸附，只有γ球蛋白不被吸附。因此，通過柱層析γ球蛋白便可在洗脫中先流出,而其他蛋白則被吸附在柱上,從而便可分離獲得純化的IgG。DEAE-sephadexA-50柱層析是...
1975年，Kohler和Milstein發現將小鼠骨髓瘤細胞和綿羊紅細胞免疫的小鼠脾細胞進行融合，形成的雜交細胞既可產生抗體，又可無限增殖，從而創立了單克隆抗體雜交瘤技術。這一技術上的突破不僅為醫學與生物學基礎研究開創了新紀元，也為臨床疾病的診、防、治提供了新的工具。制備單克隆抗體包括動物免疫、細胞融合、選擇雜交瘤、檢測抗體、雜交瘤細胞的克隆化、凍存以及單克隆抗體的大量生產，要經過幾個月的一系列實驗步驟，下面按照制備單克隆抗體的流程順序，逐一介紹其實驗方法。細胞融合前準備細...
撰稿李恩善免疫血清的制備是一項常用的免疫學實驗技術。價、高特異性的免疫血清可作為免疫學診斷的試劑（如用于制備免疫標記抗體等），也可供特異性免疫治療用。免疫血清的效價高低取決于實驗動物的免疫反應性及抗原的免疫原性。如以免疫原性強的抗原刺激高應答性的機體，常可獲得價的免疫血清。而使用免疫原性弱的抗原免疫時，則需同時加用佐劑以增強抗原的免疫原性。免疫血清的特異性主要取決于免疫用抗原的純度。因此，如欲獲得高特異性的免疫血清，必須予先純化抗原。此外，抗原的劑量、免疫途徑及注射抗原的時間...
薄基底膜腎病Ⅳ型膠原α鏈分布的免疫組化研究張承英朱世樂章友康鄭欣鄂潔侯平薄基底膜腎病（TBMN）是以持續性鏡下血尿為主要表現的一種遺傳性腎病，腎小球基底膜（GBM）彌漫性變薄為該病惟一重要的病理學特征。既往關于Alport綜合征（Alportsyndrome,AS），另外一種以持續性鏡下血尿,GBM變薄增厚、撕裂、分層為特征的遺傳性腎病，Ⅳ型膠原α鏈分布的免疫組化研究較多，眾多研究表明,AS患者腎小球基底膜Ⅳ型膠原α3、α4、α5鏈表達缺陷［1］,而關于薄基底膜腎病Ⅳ型膠原α...
趙彩彥劉金星王淑琴甄真周俊英采用ABS-ELISA法（藥盒由比利時Innogentics公司提供）和雙抗體夾心ELISA法（藥盒由法國Immunotech公司或軍事醫學科學院提供）對46例肝炎肝硬化進行了血清和腹水中IL-6、IL-2、TNF-α的測定。與正常對照組比較，肝炎肝硬化患者血清和腹水IL-6、TNF-α水平明顯升高，IL-2水平明顯降低。合并自發性腹膜炎（SBP）患者血清IL-6、TNF-α水平為（33.19±12.31）ng/L,（11.73&pl...
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